脱氧核糖核酸DNA修饰ZIF-11薄膜,DNA修饰金属有机框架物薄膜

DNA(脱氧核糖核酸)的分离方法

一般采用化学方法分离DNA,再用DNA探针检验,可以获得代表每个人基因组的DNA图谱。其程序包括七个环节:

1、提取。先将DNA从检材细胞核中提取出来。不同检材的性质不同,提取和纯化DNA的方法也不完全相同。

2、酶解。由特定的限制性内切酶裂解DNA分子长链。由干每个人DNA分中碱基排列呈现多样性,所以酶切碱基后,就获得在数量和长度上体现个体差异的若干DNA片段。

3、电泳。琼脂糖凝胶是一层充满网孔的胶状物,在电泳时,其一端为正极,另-端为负极。DNA片段带负电,当将它加在凝胶负极板后,就会向正极缓慢泳动,泳动速度和距离取决于片段长度大小。经过一段时间,DNA片段按长短顺序排列开来。

4、转移。经电泳展开的DNA片段通过吸印或真空转移法,转移并固定到硝酸纤维素膜或尼龙膜上。

5、探针标记与杂交。所谓探针标记,就是使用专门的试剂,经过特定的反应,在不破坏DNA排列结构的前提下,使DNA片段能产生放射线(同位素探针),或显色发光(非同位素探针),从而可以识别DNA片段。标记好的探针需与附着有DNA片段的转移膜温育,才能结合,这个过程叫“杂交”。杂交后清洗未结合的多余探针。

6、显影。将杂交好的膜与X光感光片重合放在暗盒内感光,再经显影、定影,即得到DNA图谱。

7、检验。将检材DNA图谱与样本DNA图谱进行谱带比较。一般若有15条以上谱带相同,又不存在差异(不吻合谱带),则可做认定结论。但现场检材会由于各种客观原因,使DNA图谱不完整,所以用15条以上谱带完全吻为标准是不现实的。

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